本測(cè)定方法主要模擬自然界霉菌生長(zhǎng)的環(huán)境條件，按霉菌生長(zhǎng)的生理特點(diǎn)設(shè)計(jì)加速試驗(yàn)。在試樣表面接種霉菌孢子，然后將試樣放置在適合霉菌生長(zhǎng)的環(huán)境條件下培養(yǎng)，觀察霉菌在試樣表面的生長(zhǎng)情況。根據(jù)試樣表面長(zhǎng)霉程度對(duì)漆膜的耐霉菌性進(jìn)行評(píng)定分級(jí)。

將測(cè)菌片浸入被測(cè)液體中數(shù)秒。也可以使用液體直接沖淋測(cè)菌片表面。將測(cè)菌片培養(yǎng)于擰緊的原包裝保護(hù)管中，使用恒溫恒濕箱測(cè)試，并在30/25℃中培養(yǎng)2-5天，以檢查樣品是否被細(xì)菌或真菌污染。該方法的檢測(cè)限約為1CFU/cm²或100cfu/mL。

-mikrocount® TPC（營(yíng)養(yǎng)瓊脂）：用于檢測(cè)細(xì)菌。30℃的溫度適合細(xì)菌生長(zhǎng)。通常培養(yǎng)1-2天就足以讓細(xì)菌生長(zhǎng)。

-mikrocount® duo（虎紅瓊脂）：用于檢測(cè)真菌，包括酵母、霉菌。25℃的溫度適合酵母和霉菌的生長(zhǎng)。通常培養(yǎng)2-3天就足夠酵母生長(zhǎng)，培養(yǎng)5-7天就足夠真菌生長(zhǎng)。

培養(yǎng)結(jié)束后觀察培養(yǎng)基表面是否含有細(xì)菌和真菌。如果有細(xì)菌則進(jìn)行紫外殺菌，并再次復(fù)測(cè)。

1、將無(wú)菌的樣漆按照產(chǎn)品施工工藝進(jìn)行電泳制板。樣板要求5cm*5cm的方形尺寸鋁板。每個(gè)樣品4-6塊樣板，在恒溫恒濕的環(huán)境下養(yǎng)護(hù)16小時(shí)以上。

2、按 GB/T 1741標(biāo)準(zhǔn)將需要的9種試驗(yàn)菌種在生物安全柜內(nèi)用無(wú)菌接種環(huán)挑取霉菌孢子，接種于馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)基（PDA）上，在28℃～30℃條件下培養(yǎng)7ｄ～14ｄ，當(dāng)培養(yǎng)基表面長(zhǎng)滿霉菌孢子時(shí)，加入1mL無(wú)菌水，在生物安全柜內(nèi)用無(wú)菌接種環(huán)在無(wú)菌操作條件下輕輕地刮取霉菌培養(yǎng)物表面的霉菌孢子，制成霉菌孢子懸浮液。

3、將需測(cè)試的樣板放在紫外燈下照射30-60min，進(jìn)行殺菌，防止外界環(huán)境帶來(lái)的污染影響。向無(wú)菌培養(yǎng)皿中倒入約20ｍＬ營(yíng)養(yǎng)鹽瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)基凝固后，在無(wú)菌條件下，將3個(gè)試驗(yàn)樣品和３個(gè)對(duì)照樣品分別放置在裝有培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿表面中央。用無(wú)菌噴霧器向每個(gè)試驗(yàn)樣品和對(duì)照樣品表面和培養(yǎng)基表面均勻噴灑0.41mL～0.61mL混合霉菌孢子液，使整個(gè)試驗(yàn)樣品和對(duì)照樣品表面和培養(yǎng)基表面濕潤(rùn)。將已接種的試驗(yàn)樣品和對(duì)照樣品置于恒溫恒濕培養(yǎng)箱中，在溫度25℃～30℃、相對(duì)濕度不低于85％的條件下培養(yǎng)7ｄ后目視檢查對(duì)照樣品上霉菌生長(zhǎng)情況，３個(gè)對(duì)照樣品均應(yīng)有霉菌生長(zhǎng)，否則試驗(yàn)無(wú)效，應(yīng)重新進(jìn)行試驗(yàn)。若每個(gè)對(duì)照樣品上均可見霉菌生長(zhǎng)，則繼續(xù)培養(yǎng)試驗(yàn)樣品和對(duì)照樣品至28ｄ后進(jìn)行結(jié)果評(píng)定。（經(jīng)有關(guān)方商定，可以延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至56ｄ）。

培養(yǎng)結(jié)束后，將試驗(yàn)樣品從恒溫恒濕培養(yǎng)箱取出，應(yīng)先目視檢查，長(zhǎng)霉面積占比小于10％時(shí)用顯微鏡放大50倍觀察，按表4評(píng)定耐霉菌性等級(jí)。結(jié)果以至少兩塊樣板的級(jí)別一致為準(zhǔn)，若任意兩個(gè)平行試樣的耐霉菌性等級(jí)相差兩個(gè)及以上等級(jí)時(shí)應(yīng)重新進(jìn)行試驗(yàn)。